БИОРЕГУЛЯТОРЫ НОВОЙ ГРУППЫ, ВЫДЕЛЕННЫЕ ИЗ СРЕДЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ГРИБА Fusarium sambucinum

>
Богданов В. В., Фаткулина Э. Ф., Григораш А. И.*, Ямскова В. П.**, Ямсков И. А.
Институт элементоорганических соединений им. А. Н. Несмеянова РАН, Москва;
*ООО «Гелла-Фарма», Москва
**Институт биологии развития им. Н. К. Кольцова РАН, Москва;

ООО «Гелла-Фарма» разработала на ее основе биодобавку «Флоравит», предназначенную для профилактики многих распространенных заболеваний, в том числе заболеваний печени [1]. Поэтому изучение культуральной среды FusariumSambusinum (F.S) является акутальной задачей микобиотехнологий.
В этом аспекте следует отметить новые биорегуляторы, выделенные в отдельную группу мембранотропных гомеостатических тканеспецифических биорегуляторов (МГТБ) [2]. МГТБ были обнаружены ранее в различных тканях позвоночных и беспозвоночных животных, растений. МГТБ в сверхмалых дозах (лежащих в области концентраций, соответствующих 10-8 – 10-15 мг белка в мл) оказывают влияние на основные биологические процессы, такие, как клеточная дифференцировка, пролиферация, миграция, адгезия, апоптоз.
Было показано, что активность МГТБ характеризуется проявлением тканевой, но отсутствием видовой специфичности. Для исследования МГТБ был разработан определенный экспериментальный подход, включающий методы выделения и очистки данных биорегуляторов, метод их биотестирования, основанный на оценке параметра их мембранотропной активности, методов изучения их физико-химических свойств и исследования их специфической активности. Выделение МГТБ из среды культивирования гриба F.S. проводили с использованием ряда биохимических методов, биотестирование осуществляли оригинальным адгезиометрическим методом, в основе которого лежит определение параметра вязкоупругих свойств клеточных мембран при множественном органотипическом культивировании печени мышей invitro.
Исследование физико-химических свойств полученных МГТБ проводили методами кругового дихроизма, лазерного динамического светорассеивания и MALDI-TOF масс-спектрометрии.
Полученные результаты показали, что в среде культивирования F.S. присутствуют биорегуляторы, проявляющие свойства, сходные по свойствам с МГТБ. Они проявляли специфическую для МГТБ мембранотропную активность, их вторичная структура характеризовалась преимущественным содержанием ß-структур и статистического клубка, в их растворах присутствовали крупные наноразмерные частицы. Так же, как и другие МГТБ, они имели сложный состав, причем биологически активной была пептидно-белковая компонента.
Исследование специфического биологического действия проводили на новой модели роллерного органотипического культивирования ткани печени тритона invitro. Оценку биологического действия МГТБ, выделенных из среды культивирования гриба F.S. проводили по изменению количества пигментированных клеток в ткани печени амфибии при воздействии изучаемых фракций.
Следует отметить, что пигментированнные клетки печени амфибий представляют собой меланомакрофаги – аналоги Купферовых клеток печени млекопитающих. Они выполняют защитную функцию в железе, осуществляя поглощение бактерий, вирусных частиц, детрита,  а также детоксикацию. Поэтому увеличение их количества свидетельствует об усилении защитных свойств железы.
Полученные нами результаты показали, что фракции, содержащие МГТБ, выделенные из среды культивирования гриба F.S. способствуют увеличению количества меланомакрофагов в печени тритона при роллерном органном культивировании. Предполагается, что обнаруженные нами МГТБ обладают гепатопротекторной активностью.
Литература:
1. Погорельская Л.В. и др. Биологически активная добавка «Флоравит Э» в гастроэнтерологии. Методические рекомендации. МЗ РФ Российская медицинская академия последипломного образования. М., 2005, 68 с.
2. Ямскова В.П., Краснов М.С., Ямсков И.А. // Новые экспериментальные и теоретические аспекты в биорегуляции. Механизм действия мембранотропных гомеостатических тканеспецифических биорегуляторов. Saarbrucken: Lambert Academic Publishing. 2012. p. 127.